PCR實(shí)驗室規(guī)劃方案
PCR 實(shí)驗室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗室。PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的 DNA 片段,可看作生物體外的特殊 DNA 復(fù)制。此項技術(shù)有助于快速了解患者體內(nèi)的病毒載量,為臨床診斷和治療提供重要參考。
PCR 實(shí)驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組 PCR 實(shí)驗,通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個實(shí)驗過程,若實(shí)驗工藝需要,還應(yīng)增加樣品粉碎過程。
1、分散形式 PCR 實(shí)驗室
分散形式 PCR 實(shí)驗室,是指完成上述實(shí)驗過程的實(shí)驗用房彼此相距較遠(yuǎn),呈分散布置形式。對于這種布置形式的 PCR 實(shí)驗室,由于各個實(shí)驗區(qū)相對獨(dú)立,相互干擾風(fēng)險較低,對整體布局的特殊要求相對較少。
2、組合形式 PCR 實(shí)驗室
組合形式 PCR 實(shí)驗室,是指完成 PCR 四個實(shí)驗過程的實(shí)驗用房相鄰布置,組成獨(dú)立實(shí)驗區(qū)域的形式。對于組合形式 PCR 實(shí)驗室,由于各個實(shí)驗間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間,以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入,造成污染;核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓,以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品。
如果使用熒光 PCR 儀,擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。
若房間進(jìn)深允許,可設(shè) PCR 內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。
各個區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實(shí)驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。
PCR 實(shí)驗室的空氣流向必須嚴(yán)格按照試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進(jìn)行,防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。因此,通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計至關(guān)重要。若設(shè)計不合理,可能導(dǎo)致氣流紊亂,甚至對人員健康構(gòu)成潛在威脅。
標(biāo)準(zhǔn)的 PCR 實(shí)驗室設(shè)計規(guī)范
1、主體結(jié)構(gòu)
主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金 50 內(nèi)圓角鋁,從而有效減少污染、積塵和清潔困難等問題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡明,美觀大方,密封性好。
2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)
將 PCR 過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和 PCR 擴(kuò)增檢測三個獨(dú)立的實(shí)驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨(dú)立實(shí)驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),從而在整個 PCR 實(shí)驗過程中,有效降低試劑和標(biāo)本受到氣溶膠污染的風(fēng)險,并減少擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的潛在污染。
可打開緩沖區(qū),PCR 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣,在實(shí)驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口,空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。
3、消毒
在實(shí)驗區(qū)和緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈,供消毒用。
在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動紫外線燈,對實(shí)驗桌進(jìn)行局部消毒。
4、機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗
試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼(不建議使用電子連鎖方式)傳遞窗傳遞,有助于降低試劑和標(biāo)本在傳遞過程中的污染風(fēng)險(人物分流)。
5、地面
地面建議選用PVC 卷材地面或自流坪地面,整體性好,便于進(jìn)行清掃,耐腐蝕。若考慮成本因素,也可選擇水磨石地面,或大塊的瓷磚(至少 800mm×800mm),接縫需要小于 2mm。
6、照明
燈具建議選用凈化燈具,以利于清洗和減少積塵。









